Imagine, o seguinte cenário: um cliente chega em nossa empresa junior com uma
amostra, querendo que identifiquemos os compostos que estão presentes. Qual técnica seria a
mais apropriada? Espectroscopia ou cromatografia?
Começaremos elencando quais as diferenças entre estes métodos analíticos! A
cromatografia, tem como ideia central a separação de componentes em função de suas
características, essas características determinam a interação dessas substâncias presentes na
solução com uma fase móvel e uma fase estacionária. Já a espectroscopia tem como ideia central
a identificação, utiliza a interação entre a radiação eletromagnética (luz) e a matéria
(átomos/moléculas). Essa análise pode ser feita em função da emissão ou da absorção dessa
radiação.
Em resumo, a cromatografia visa a separação enquanto a espectroscopia identificação.
Como se a cromatografia separasse as peças de um quebra cabeça, e a espectroscopia entendesse
o desenho delas.

Em resumo, a cromatografia visa a separação enquanto a espectroscopia identificação.
Como se a cromatografia separasse as peças de um quebra cabeça, e a espectroscopia entendesse
o desenho delas.
Portanto, quando se trata de misturas complexas, o ideal é a utilização de técnicas
cromatográficas para posterior análise ou quantificação. Em amostras simples utilizamos a
espectroscopia diretamente. Isso nos leva a um viés, quando usar as duas técnicas em conjunto?
Diversas vezes, devido a complexidade da mistura, é necessário uma separação prévia
dos analitos para então realizar a sua caracterização. Esses equipamentos/técnicas existem de
maneira acoplada. Das trabalhadas comumente (Cromatografia + Espectroscopia) dentro da
Soluções Químicas Júnior temos GC-MS e HPLC-DAD.
Mas o que isso significa na prática? Em muitos casos reais, a amostra não é pura,
juntamente ao analito existem diversos compostos, possíveis interferentes. A cromatografia
resolve isso ao separar os componentes com base em: polaridade, afinidade com a fase
estacionária, tamanho das moléculas, carga elétrica e volatilidade (dependendo da técnica, uma
vez que existem diversos tipos de cromatografia). Os tipos de cromatografia incluem:
● Cromatografia Gasosa (GC);
● Cromatografia Líquida (GL);
● Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (HPLC);
● Cromatografia em Camada Delgada (CCD);
● Cromatografia em Coluna;
● Cromatografia por Troca Iônica;
● Cromatografia de Exclusão por Tamanho (GPC/SEC).

Agora falando de espectroscopia, como citado anteriormente, ela tem base na interação
entre a radiação eletromagnética com a matéria, sendo ela dividida em absorção, emissão ou
espalhamento de energia. Ou seja, quando a molécula/átomo passa de um nível de energia E1
para E2, conseguimos observar essa variação de energia.

● Absorção: medidas de absorção são cometidas quando irradiamos energia
eletromagnética em uma molécula/átomo e o analito absorve essa energia, passando de
seu estado fundamental para um estado excitado, essa excitação ocorre de maneira
proporcional a sua concentração. A lei de Lambert-Beer estabelece que a absorbância de
luz por uma amostra é diretamente proporcional à sua concentração e ao comprimento do
caminho óptico, sendo expressa pela fórmula:

                                                                      𝐴 = ϵ. 𝑙. 𝑐
                                                                         Lei de Lambert-Beer

● Emissão: um átomo ou molécula é excitado, a emissão é calculada pela detecção da
radiação eletromagnética emitida por ele ao retornar ao seu estado fundamental.

Assim como a Cromatografia, existem diversos tipos de Espectroscopia! Escolhemos a
melhor técnica a partir da faixa de comprimento de onda de absorção ou emissão da molécula
observada! Uma vez que, quantidades de energia distintas atuam de diferentes formas
dependendo do analito! Desejamos uma faixa de comprimento de onda onde não haja
degradação/alterações na estrutura com que trabalhamos. Além disso, mesmo que não ocorram
deformações, moléculas/átomos não absorvem/emitem em comprimentos de onda diversos.
Geralmente, o comprimento de onda ou cor que uma substância mais absorve é
complementar ao que ela apresenta.